Page 172 - 《华中农业大学学报(自然科学版)》2022年第5期
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               2.6  PCR-C10F 对抗氧化酶和应激反应蛋白的                      著升高(P<0.001),HO-1 蛋白表达水平显著降低
               影响                                              (P<0.05)。 因 此 ,以 上 结 果 表 明 ,在 t-BHP 诱 导
                   进一步分析 t-BHP 刺激诱导下 HepG2 细胞中                  HepG2 细胞氧化损伤的作用下,PCR-C10F 能够在
               NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px 抗 氧 化 酶 蛋 白 和             基因和蛋白水平通过上调 Nrf2-ARE 抗氧化信号通
               HO-1 应激反应蛋白的 表 达 情 况 ,结 果 如 图 5 所                路 下 游 多 种 抗 氧 化 酶(NQO1、GSTO1、SOD1 和
               示 ,与 模 型 组 相 比 ,在 PCR-C10F 药 物 干 预 作 用           GSH-Px)的表达,下调应激反应蛋白(HO-1)的表
               下 ,NQO1 和 SOD1 蛋 白 表 达 水 平 极 显 著 升 高             达,从而维持细胞氧化/抗氧化动态平衡状态,增强
              (P<0.01),GSTO1 和 GSH-Px 蛋白表达水平极显                  细胞在氧化应激损伤下的抗氧化防御能力。





























                 A:提取细胞中总蛋白,通过 Western blot 技术测定 HepG2 细胞中 NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px、HO-1 蛋白的表达水平,β-actin 作为
               内参 The total protein were extracted to measure the expression levels of NQO1,GSTO1,SOD1,GSH-Px and HO-1 protein in HepG2 cells
               via western blot. β-actin was used as the reference protein for total protein;B~F 分别为 NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px、HO-1 蛋白表达水
               平的统计分析结果,结果以平均值±标准差表示,n=3。The statistical analysis results of the expression levels of NQO1,GSTO1,SOD1,
               GSH-Px and HO-1 protein. Results were presented as mean ± SD,n=3.
                    图5   PCR-C10F对t-BHP诱导HepG2细胞中NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px和HO-1 蛋白表达水平的影响
                          Fig.5  Effect of PCR-C10F on protein levels of NQO1,GSTO1,SOD1,GSH-Px and HO-1
                                                 in HepG2 cells induced by t-BHP
               3    讨    论                                      与 Liang 等 [15] 提出的陈皮在陈化过程中,橙皮苷含
                                                                量降低,橘皮素、川陈皮素等多甲氧基黄酮类化合物
                   黄酮类化合物是陈皮发挥生物活性的重要物质
                                                                含量呈现增加的趋势相一致,多甲氧基黄酮类化合
               基础,中国药典以橙皮苷含量作为陈皮质量评价指
                                                                物的含量增加可能是陈皮在陈化过程中活性变化的
               标,“陈久者良”在陈皮使用和市场定价中被广泛认
                                                                重要影响因素。
               同,然而橙皮苷含量变化与陈皮的陈化年限并不一
                                                                    t-BHP是一种氧化损伤诱导剂,可以与细胞膜上
               致 [14-15] 。本研究结果也表明,不同贮藏年份的陈皮
                                                                的脂质、蛋白质等生物大分子反应引起氧化损伤                    [16] 。
               中橙皮苷的含量呈现波动状态,其中贮藏 10 a 的陈
               皮中橙皮苷的含量较新鲜果皮显著降低,提示需要                           因此,选择 t-BHP 诱导的 HepG2 细胞氧化损伤模型
               引入更多的黄酮类化合物作为评价指标。本研究显                           探究 PCR-CF 的抗氧化活性,结果表明,PCR-CF 可
               示异橙黄酮、甜橙黄酮、5,7,8,4'-四甲氧基黄酮、川                     通过提高 SOD 活性和 GSH 含量,减少 t-BHP 诱导产
               陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、橘皮素以及                 生的过量 MDA,发挥抗氧化活性作用;而且在陈化
               总 PMFs,在陈化过程中虽然呈现波动状态,但 PCR-                     的过程中,呈现增强的趋势,其中以 PCR-C10F 的氧
               C10F 中的含量最高,整体上表现出增加的趋势。这                        化应激保护作用最显著。
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