Page 171 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

第 5 期 陶叶杏 等：广陈皮中黄酮类化合物提取物对 t-BHP 诱导 HepG2 细胞氧化损伤保护作用机制 165

A：分别提取总蛋白和胞核蛋白，通过 Western blot 技术测定 HepG2 细胞中 Nrf2 蛋白表达情况，Histone H3 作为胞核蛋白内参，β-actin
作为总蛋白内参 The total protein and nuclear protein were extracted to measure the expression level of Nrf2 protein in HepG2 cells via West⁃
ern blot. Histone H3 was used as the reference protein for nuclear protein and β-actin was used as the reference protein for total protein. B~D 分
别为 Nrf2蛋白在胞核蛋白、总蛋白以及两者之比中表达水平的统计分析结果。结果以平均值±标准差表示，n=3。The statistical analysis
results of the expression levels of Nrf2 protein in nucleus protein，total protein and the ratio of nucleus Nrf2 to total Nrf2. Results were present⁃
ed as mean ± SD，n=3.
图3 PCR-C10F对t-BHP诱导HepG2细胞Nrf2 蛋白表达的影响
Fig.3 Effect of PCR-C10F on protein levels of Nrf2 in HepG2 cells induced by t-BHP

HO-1 基因的 mRNA 表达水平，探究 PCR-C10F 能否 0.001）。以上结果表明，在 t-BHP 诱导 HepG2 细胞
通过促进 Nrf2 入核上调细胞内抗氧化相关基因的表 氧化损伤的作用下，PCR-C10F 能够通过上调 Nrf2-
达。如图 4A~E 所示，与模型组相比，在 PCR-C10F ARE 抗 氧 化 信 号 通 路 下 游 多 种 抗 氧 化 酶 基 因
药物干预作用下，NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px （NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px）的表达，下调应激
基因的 mRNA 表达水平极显著上调（P<0.001）， 反应蛋白（HO-1）的基因表达，维持细胞氧化/抗氧化

HO-1 基 因 的 mRNA 表 达 水 平 极 显 著 降 低（P< 动态平衡状态。

提取分离细胞总 RNA 后，通过 qRT-PCR 技术测定 HepG2 细胞中 NQO1（A）、SOD1（B）、GSTO1（C）、GSH-Px（D）、HO-1（E）基因
mRNA 表达水平。GADPH 作为内参基因，结果以平均值±标准差表示，n=3。The total RNA were extracted to measure mRNA expres⁃
sion of NQO1（A），SOD1（B），GSTO1（C），GSH-Px（D）and HO-1（E）in HepG2 cells via qRT-PCR. GADPH was used as the reference
gene.Results were presented as mean ± SD，n=3.
图4 PCR-C10F对t-BHP诱导HepG2细胞中NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px和HO-1 mRNA表达水平的影响
Fig.4 Effect of PCR-C10F on mRNA expression of NQO1，GSTO1，SOD1，GSH-Px and HO-1
in HepG2 cells induced by t-BHP