Page 167 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期
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第41卷 第5期                          华  中   农   业  大   学  学   报                        Vol.41  No.5
               2022年   9月                    Journal of Huazhong Agricultural University      Sep. 2022，161~168

               陶叶杏，余倩，刘瑞婷，等 .广陈皮中黄酮类化合物提取物对 t-BHP 诱导 HepG2 细胞氧化损伤保护作用机制［J］.华中农业大学学报，2022，41
               （5）：161⁃168.DOI：10.13300/j.cnki.hnlkxb.2022.05.020

                      广陈皮中黄酮类化合物提取物对t-BHP诱导HepG2

                                         细胞氧化损伤保护作用机制


                               陶叶杏，余倩，刘瑞婷，张曦文，吴婷，潘思轶，徐晓云


                                     华中农业大学食品科学技术学院/环境食品学教育部重点实验室/
                                          果蔬加工与品质调控湖北省重点实验室，武汉 430070


                       摘要   为了研究陈化对于广陈皮抗氧化活性的影响，以新鲜干燥果皮、贮藏 1 a 和 10 a 广陈皮（Pericarpium
                   Citri Reticulatae‘Chachi’，PCR-C）为研究对象，提取纯化得到广陈皮黄酮类化合物提取物（PCR-CF），以叔丁
                   基过氧化氢（t-BHP）诱导 HepG2 细胞作为氧化应激损伤模型，评价陈皮的抗氧化活性，同时利用 qRT-PCR 和
                   Western blot 技术进一步探究其抗氧化活性作用分子机制。结果显示，广陈皮陈化过程中，橙皮苷含量呈现波
                   动，但总体上是下降趋势；而多甲氧基黄酮及其总含量呈增加趋势，其中 PCR-C10F 中含量最高，PMFs 总含量
                   达到（98.66±0.56）mg/g。而且，不同贮藏年份 PCR-CF 可明显提高 SOD、GSH 水平和降低 MDA 含量，且不同
                   年份间差异显著，PCR-C10F 抗氧化活性最强，SOD、GSH、MDA 水平分别达到（139.38±17.38）U/mg 和
                   （117.81±3.22）μmol/g、（0.39±0.03）nmol/mg。相关性分析表明，川陈皮素的积累是 PCR-C10F维持氧化还原
                   平衡的主要活性成分。此外，PCR-C10F 显著上调 Nrf2 mRNA 以及其在胞核蛋白中的表达；从而激活抗氧化酶
                   的mRNA和蛋白表达水平，HO-1的mRNA表达水平和蛋白表达水平显著降低。研究表明，陈皮在陈化过程中，
                   多甲氧基黄酮含量呈现增加趋势，抗氧化活性不断增强，PCR-C10F能够通过调控 Nrf2-ARE抗氧化信号通路起
                   到氧化应激抵御保护作用。
                       关键词    广陈皮；黄酮类化合物；抗氧化活性；Nrf2-ARE通路
                       中图分类号      R285.5   文献标识码      A    文章编号     1000-2421（2022）05-0161-08


                   广陈皮（Pericarpium Citri Reticulatae‘Chachi’， 还原酶 1（NQO1）、超氧化物歧化酶 1（SOD1）、谷胱
               PCR-C）来源于茶枝柑（Citri reticulata‘Chachi’）的          甘肽 S-转移酶-Ω1（GSTO1）、谷胱甘肽过氧化物酶
                                                       ［1］
               干燥成熟果皮，主要产于广东省江门市新会区 。研 （GSH-Px）以及血红素加氧酶-1（HO-1），在氧化应激
               究表明，PCR-C 具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗哮喘、 损伤下，能够清除体内多余的活性氧，从而在维持细
                                                                                                   ［7］
               神经保护作用等生物活性             ［2-3］ 。黄酮类化合物是           胞内氧化还原稳态方面发挥着重要作用 。而 Nrf2
               PCR-C 中的主要活性成分，主要包括橙皮苷、川陈皮 （nuclear factor erythroid 2-related factor 2）是一种核
               素、橘皮素等糖苷黄酮类化合物和多甲氧基黄酮类                           因子 E2 相关因子 2，这些抗氧化酶的表达由 Nrf2 进
               化合物 。而且，黄酮类化合物的动态变化对 PCR-                        行调控。当 Nrf2 被激活后，Nrf2 与 Keap1 蛋白发生
                     ［4］
               C质量和活性的影响尚不清楚。                                   解离，从细胞质转移至细胞核内，与细胞核内的抗氧
                   氧化应激与人类多种慢性疾病的发生和发展密                         化反应元件 ARE 进行结合，从而诱导下游抗氧化酶
                                                                                                       ［8］
               切相关 。黄酮类化合物表现出较强的抗氧化生物                           的表达，发挥维持机体内氧化还原稳态的作用 。黄
                     ［5］
               活性，可以作为一种间接抗氧化剂，通过调控细胞内                          酮类化合物可通过 Nrf2-ARE 抗氧化信号通路发挥
                                                                                                     ［9］
               相关抗氧化酶的表达来激活体内的抗氧化机制，从                           抗氧化活性，成为一种潜在的 Nrf2 激活剂 。橘皮
                                      ［6］
               而维持机体氧化还原稳态 。调控细胞内源性抗氧                           素能够有效抑制叔丁基过氧化氢（t-BHP））诱导的
               化系统的一系列抗氧化酶和解毒酶主要包括醌氧化                           HepG2 细胞中 ROS 水平的升高，减弱氧化应激损伤

               收稿日期：2022-05-22
               基金项目：国家自然科学基金项目（32172140）；中央高校基本科研业务费专项（2662020SPPY008）
               陶叶杏，E-mail：yexing.tao@webmail.hzau.edu.cn
               通信作者：徐晓云，E-mail：xuxiaoyun@mail.hzau.edu.cn
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