Page 170 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

164 华 中 农 业 大 学 学 报 第 41 卷

合物与抗氧化活性之间是否具有相关性，对 PCR-CF 2.3 PCR-C10F对Nrf2 基因mRNA表达的影响
中黄酮类化合物的含量与 SOD、GSH 和 MDA 水平 PCR-C10F 抗氧化活性较强，为了进一步探究
进行 Pearson 相关性分析（表 3），总 PMFs 含量与 PCR-C10F 对 t-BHP 诱导的 HepG2 细胞氧化损伤的
2
SOD、GSH 水 平 呈 现 显 著 正 相 关（R =0.845、 保护作用机制，使用 qRT-PCR 考察了 PCR-C10F 对
0.934，P<0.01），与 MDA 水 平 呈 现 显 著 负 相 氧化应激状态下 Nrf2 基因水平的影响。如图 2 所
关（R =−0.903，P<0.01）。在所分析的黄酮类化 示，与模型组相比，在 PCR-C10F 药物干预作用下，
2
合物中，只有川陈皮素含量不仅与 SOD、GSH 水平 细胞内 Nrf2 基因 mRNA 的表达水平极显著上调
2
呈现显著正相关（R =0.934、0.861，P<0.01），而
（P<0.001）。结果表明，PCR-C10F 能够通过上调
且 与 MDA 水 平 呈 现 显 著 负 相 关（R =−0.918，
2
Nrf2 基因 mRNA 的表达，从而有效减轻 t-BHP 诱导
P<0.01）。结果表明，川陈皮素可能是 PCR-CF减轻
的HepG2细胞氧化损伤。
t-BHP 诱 导 的 HepG2 细 胞 氧 化 损 伤 的 关 键 活 性
成分。
表2 PCR-CF对t-BHP诱导的HepG2细胞中SOD、
GSH、MDA水平的影响
Table 2 Effect of PCR-CF on t-BHP-induced the
levels of SOD，GSH and MDA in HepG2 cells

组别 Group SOD/(U/mg) GSH/ (μmol/g) MDA/ (nmol/mg)
对照Control 154.64±10.23a 116.39±2.85a 0.32±0.09a
Model 101.88±6.40d 56.26±3.40c 1.14±0.13c

Fresh-F 123.76±12.13c 95.32±8.55b 0.54±0.08b
GADPH 作为内参基因。结果以平均值±标准差表示，n=3。
PCR-C01F 106.98±6.84d 94.10±4.07b 0.65±0.04b
*，P<0.05，**，P<0.01，***，P<0.001，下同。GADPH was used
PCR-C10F 139.38±17.38b 117.81±3.22a 0.39±0.03a as the reference gene. Results were presented as mean ± SD，n=3.
注 Note：同列字母不同代表差异显著（P<0.05）。Different let⁃ *，P< 0.05，** ，P< 0.01，*** ，P< 0.001. The same as below.
ters in the same column represent significant differences（P<0.05）. 图2 PCR-C10F对t-BHP诱导HepG2细胞
表3 PCR-CF中黄酮类化合物的含量与SOD、 Nrf2 mRNA表达的影响
GSH和MDA水平相关性分析 Fig.2 Effect of PCR-C10F on mRNA expression
Table 3 Pearson correlation analysis between the of Nrf2 in HepG2 cells induced by t-BHP
content of flavonoids and the levels of SOD， 2.4 PCR-C10F对Nrf2蛋白转移入核的影响
GSH and MDA in PCR-CF 为了进一步确定 PCR-C10F 能否促进细胞内

因素 Variable SOD GSH MDA Nrf2 转移入核，测定 Nrf2 蛋白的表达情况。如图
橙皮苷 Hesperidin 0.647 0.205 −0.425 3A，B 所示，与模型组相比，在 PCR-C10F 药物干预
异橙黄酮 Isosinensetin 0.558 0.117 −0.35 作用下，Nrf2 在胞核蛋白中的表达水平显著增加
甜橙黄酮 Sinensetin 0.887 ** 0.576 −0.736 * （P<0.05）。图 3A，C 表明，在 PCR-C10F 药物干预
5,7,8,4'-四甲氧基黄酮 5,7,8,4'- 作用下，Nrf2 在总蛋白中的表达水平显著增加（P<
0.828 ** 0.495 −0.681 *
Tetramethoxyflavone
0.05）。如图 3D 所示，与模型组相比，在 PCR-C10F
川陈皮素 Nobiletin 0.934 ** 0.861 ** −0.918 **
药物干预作用下，Nrf2 入核率显著增加（P<0.05）。
3,5,6,7,8,3'，4'-七甲氧基黄酮 3,5,
0.867 ** 0.598 −0.765 * 因此，以上结果表明，在 t-BHP 诱导 HepG2 细胞氧化
6,7,8,3',4'-Heptamethoxyflavone
损 伤 作 用 下 ，PCR-C10F 能 够 促 进 HepG2 细 胞 中
橘皮素 Tangeretin 0.226 0.656 −0.439
Nrf2 从细胞质转移至细胞核，从而促使 Nrf2 发挥其
** ** **
PMFs 0.845 0.934 −0.903
转录因子的作用。
注 Note：*相关性在 0.05 水平上显著（双尾）。**相关性在 0.01 水
平上显著（双尾）。*Correlation is significant at the 0.05 level（two- 2.5 PCR-C10F对抗氧化酶mRNA的影响
tailed）. ** Correlation is significant at the 0.01 level（two-tailed）. 测定细胞内 NQO1、GSTO1、SOD1、GSH-Px、