Page 188 - 《华中农业大学学报(自然科学版)》2022年第5期
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182 华 中 农 业 大 学 学 报 第 41 卷
果中不溶性单宁的含量,760 nm处下测定光密度 A 1 ; 0.0517,相关系数为 0.999 1;可溶性单宁组成中没食
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取对应的柿果不溶性单宁提取液 3 mL 于具塞试管 子酸的标准曲线为:Y=1×10 X+474.34,相关系数
中,加入 1.2 g 干酪素,30 ℃水浴,每隔 10 min 摇匀 1 为 0.999 7;表没食子儿茶素没食子酸酯的标准曲线
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次,吸附 60 min,1 000 r/min 离心 5 min,取上清液同 为:Y=6×10 X-2088.3,相关性系数为 0.999 3;表
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上步骤测定光密度为 A 2 ,同时设定干酪素对照,测定 儿茶素的标准曲线为:Y=3×10 X-500.24,相关系
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光密度 A 3 ;将 A 4 =A 1 -A 2 -A 3 代入标准曲线中,即得 数为 0.999 8;儿茶素的标准曲线为:Y=3×10 X-
柿果中不溶性单宁的含量。 367.64,相关系数为0.999 6。
1.8 柿 不 溶 性 单 宁 清 除 DPPH·自 由 基 能 力 的 可溶性单宁中没食子酸的分布最广,在已测
测定 定的 52 个品种中均有检测到,新秋含量最低,只
参 考 田 燕 [11] 的 方 法 测 定 柿 不 溶 性 单 宁 清 除 有(0.188±0.016)mg/100 g,邵 安 元 宵 柿 含 量 最
DPPH·能力,选取不同区域甜柿和涩柿纯化后的不 高,达(132.947±7.29)mg/100 g 。
溶性单宁,以甲醇为溶剂配制成不同浓度的溶液。 在甜柿品种中,湖北武汉的小宝盖柿总酚含量
在具塞试管中分别加入 2 mL 样品和 2×10 -4 mol/L 最高,为(2.943±0.136)g/100 g;四方甜柿 EC 和 C
的 DPPH·溶液 2 mL,混匀,室温下避光反应 30 min, 含 量 最 高 ,分 别 为(8.356±0.452)mg/100 g 和
517 nm 处测定光密度,空白组以等体积的甲醇代替 (21.039±0.497)mg/100 g;小果甜柿 EGCG 含量最
DPPH·溶液,对照组以等体积的甲醇代替样品溶液, 高,为(2.786±0.250)mg/100 g;陕西杨凌的西村早
生的 GA 含量最高,为(38.427±1.124)mg/100 g,湖
平 行 测 定 3 次 ,清 除 率 =[A 0 -(A i -A j )]/A 0 ×
100% ,式中,A 0 为对照组光密度;A i 为样品组光密 北武汉完全甜柿品种小果甜柿、上西早生、松本早
度;A j 为空白组光密度。 生、四方甜柿、罗田甜、鄂柿 1 号、小宝盖柿可溶性单
1.9 柿不溶性单宁清除羟基自由基能力的测定 宁中的总酚含量和组成整体上高于陕西杨凌完全甜
采用田燕 [11] 的方法进行,选取不同区域甜柿和 柿品种甜宝盖、前川次郎、新秋、爱知早生可溶性单
涩柿纯化后的不溶性单宁,以甲醇为溶剂配制成不 宁中的含量。在涩柿品种中,湖北武汉的黄边小鸡
同浓度的溶液。在离心管中依次加入 1 mL 不同浓 心 总 酚 和 儿 茶 素(C)含 量 最 高 ,分 别 为(9.283±
度的样品溶液,8.0 mmol/L 硫酸亚铁,20 mmol/L 过 0.328)、(64.389±0.735)mg/100 g,邵安元宵柿 GA
氧化氢 0.25 mL,3.0 mmol/L水杨酸 1.0 mL。将离心 含 量 最 高 ,为(132.947±7.29)mg/100 g,金 枣 柿
管置于 37 ℃反应 30 min,流水冷却,各管中分别加入 EGCG 含量最高,为(3.603±0.274)mg/100 g,陕
0.45 mL 蒸馏水,混匀,2 000 r/min 离心 10 min,取上 西 的 小 面 糊 EC 含 量 最 高 ,为(6.200±0.124)
mg/100 g。PVNA 中没食子酸含量显著高于其在
清于 510 nm 下测定值。清除率=[A 0 -(A 1 -A 2 )]/
A 0 ×100% ,式中,A 0 为未加清除剂的光密度;A 1 为 PCNA 中的含量。近缘种君迁子、金枣柿、油柿、德阳
加入清除剂的光密度;A 2 为试剂空白的光密度。 柿 ,君 迁 子 总 酚 、EC、EGCG 含 量 最 高 ,分 别 为
1.10 数据处理及分析 (10.564±0.742)g/100 g 、(9.084±1.032)mg/100 g、
不同样品测定均为 3 次重复,采用 Excel 2019 和 (4.265±0.484)mg/100 g,德阳柿 GA 含量最高,为
GraphPad Prism 8.0.1 进行数据处理,试验结果以“平 (32.598±0.854)mg/100 g,金枣柿 C 含量最高,为
均值±标准差”表示。 (24.533±0.168)mg/100 g。综合比较发现,不同地
区的柿果可溶性单宁含量和组成存在差异。涩柿品
2 结果与分析 种的总酚含量和没食子酸含量绝大多数高于甜柿品
2.1 柿可溶性单宁总酚含量及单体组成 种,可能因为各品种中 EGCG、EC 和 C 的含量很少,
供试 52个品种柿可溶性单宁的总酚含量及组成 所以甜柿和涩柿品种相比较无显著差异;湖北武汉
见表 2,总酚主要为没食子酸(GA)、表没食子儿茶素 完全甜柿品种中可溶性单宁的总酚含量及组成整体
没食子酸酯(EGCG)、表儿茶素(EC)和儿茶素(C)。 上高于陕西杨凌的完全甜柿品种,涩柿品种整体上
总酚含量中没食子酸的标准曲线为:Y=1.3192X+ 无显著差异。

