Page 187 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

第 5 期 张亚杰 等：不同地域和品种柿果单宁含量及组成分析 181

续表 1 Continued Table 1
编号 生物学名 材料名称 脱涩类型 来源
Serial number Scientific name Material Astringent type Source
43 Diospyros kaki Thumb. 肉柿 Roushi PCA
46 Diospyros kaki Thumb. 怀胎柿 Huaitaishi PCA
47 Diospyros kaki Thumb. 罗田甜柿Luotiantianshi PCNA
48 Diospyros kaki Thumb. 小宝盖柿 Xiaobaogaishi PCNA
湖北省武汉市华中
49 Diospyros kaki Thumb. 鄂柿1号 Eshi 1 PCNA
农业大学柿圃
50 Diospyros kaki Thumb. 上西早生 Uenishi-wase PCNA
Persimmon repository，
51 Diospyros kaki Thumb. 小果甜柿 Xiaoguotianshi PCNA
Huazhong Agricultural
52 Diospyros kaki Thumb. 松本早生 Matsumoto-wase PCNA University，Wuhan City，
34 Diospyros kaki Thumb. 四方甜柿 Sifangtianshi PCNA Hubei Province
35 D. spp. 德阳柿Deyangshi —
36 E. oleifera Cheng. 油柿Youshi —
44 D. sp. 金枣柿Jinzaoshi —
45 E. lotus L. 君迁子Date plum —
注：PCNA：完全甜柿；PCA：完全涩柿；PVNA：不完全甜柿；PVA：不完全涩柿；采样时期为 9-10月，果面呈橙色，所有柿果采摘后立即
置于-20 ℃保藏。Note：PCNA：Pollination-constant non-astringent；PCA：Pollination-constant astringent；PVNA：Pollination-variant non-
astringent；PVA：Pollination-variant astringent. The sampling period was from September to October，and the fruit surface was orange. All per⁃
simmon were stored at -20 ℃ immediately after picking.
1.2 测定方法 相色谱仪检测可溶性柿单宁提取液的单体组成。
柿可溶性单宁单体组成采用 LC-10AT 岛津高 色谱条件：色谱柱为 Agilent ZORBAX SB-Aq
效液相色谱仪测定；可溶性单宁总酚含量及不溶性 （4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相 A 为 0.13% 三氟
单宁含量采用 Folin-Denis 方法测定；不溶性单宁抗 乙酸溶液，B 为含 0.1% 的三氟乙酸的甲醇/乙腈
氧化活性以其清除DPPH·自由基能力表示。 （1/1，V/V）。梯度洗脱程序：0~10 min，0~20% B；
1.3 柿可溶性单宁和不溶性单宁提取 11~20 min，20% B；21~25 min，20%~30% B；26~
［9］
柿可溶性单宁的提取参考陈多多 的方法并略 30 min，30%~70% B；31~38 min，70% B；39~40
作修改，取冻干后的柿子粉，采用超声波辅助提取 min，70%~0 B。柱温：30 ℃；流速 0.8 mL/min，进样
法，提取溶剂为甲醇，80 ℃冷凝回流 3 次，每次 30 量 10 μL，光电二极管阵列检测器，检测波长 280 nm。
min，料液比 1∶8（m/V）合并滤液，定容备用。将提取 所有样品进样前用0.22 μm滤膜过滤。
完可溶性柿单宁的果渣收集，采用 1% 盐酸-甲醇提 1.6 柿可溶性单宁总酚含量测定
取不溶性柿单宁，料液比 1∶8（m/V），60 ℃回流提取 3 配制 1 mg/mL 的没食子酸溶液，依次稀释至
次，每次30 min，合并滤液，定容备用。 0.1、0.2、0.25、0.4、0.5 mg/mL，分别吸取 100 μL 于具
1.4 柿不溶性单宁的纯化 塞试管中，加入 500 μL 福林酚溶液，摇匀，5~8 min
取本文“1.3”提取的不溶性单宁滤液于旋转蒸发 后加入 500 μL 的 10% NaCO 3 溶液，摇匀，室温下避
仪浓缩至一定体积，取浓缩液于 AB-8 大孔树脂上吸 光放置 1 h 后，用蒸馏水定容至 5 mL，760 nm 处测定
附 40 min，用蒸馏水洗至无糖检出（苯酚硫酸法），之 其吸光度。采用相同的方法测定每个品种可溶性单

后用 10% 乙醇洗至无色，除去小分子酚酸，然后用 宁提取液的总酚含量。
95% 乙醇洗脱，收集 95% 乙醇洗脱液，35 ℃真空旋 1.7 柿不溶性单宁含量测定
转蒸发，冷冻干燥，即得不溶性单宁。 参考中国药典方法 ［10］ 并略作修改。参考董晓
1.5 柿可溶性单宁单体组成分析 倩 ［3］ 的方法制备 PT40 单宁为标准品，配制 0.1、0.2、
以没食子酸、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶 0.3、0.4、0.5、0.6 mg/mL 标准品溶液，参考本文“1.6”
素没食子酸酯为标准品，采用 LC-10AT 岛津高效液 步骤测定光密度。采用相同的方法测定不同品种柿