Page 182 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

176 华 中 农 业 大 学 学 报 第 41 卷

表明 KNGP-COX-2 配合物形成过程的驱动力为疏 更多的证据。综上所述，本研究揭示了 KNGP 对
水作用，而 KNGP-COX-2 配合物形成后的主要作用 COX-2的作用机制是与COX-2的单一位点通过氢键
力是氢键。 和 疏 水 相 互 作 用 结 合 形 成 复 合 物 ，可 为 寡 肽 段
KNGP 作为潜在的 COX-2 抑制剂提供理论基础，且
3 讨 论
本研究中肽段 KNGP 由于含有脯氨酸残基而具有抗
根据 KNGP 对 COX-2 荧光猝灭数据的分析， 酶解吸收的特性，因此，以 KNGP 作为研究对象是十
KNGP 对 COX-2 的荧光猝灭机制为静态猝灭，即 分有意义的。
KNGP 可能与 COX-2 的单一位点结合形成配合物，
导 致 荧 光 猝 灭 作 用 。 COX-2 和 KNGP 在 298 K
参考文献References
4
4
（4.3×10 L/mol）、304 K（7.5×10 L/mol）和 310 K
（12.5×10 L/mol）下作用的 K a 值大于新型芳基异 ［1］ SINGH P，KAUR S，KUMARI P，et al.Tailoring the substitu⁃
4
4
4
丙 酸 类 化 合 物（3.08×10 、3.92×10 和 5.40× tion pattern on 1，3，5-triazine for targeting cyclooxygenase-2：dis⁃
covery and structure-activity relationship of triazine-4-amino⁃
［22］
10 L/mol） ，同 时 ，COX-2 和 KNGP 的 K a 值 在
4
phenylmorpholin-3-one hybrids that reverse algesia and inflam⁃
4
5
4
5
10 ~10 ，与 保 泰 松（1.95×10 、1.25×10 、9.82× mation in Swiss albino mice［J］.Journal of medicinal chemistry，
5
4
4
10 L/mol）和布洛芬（1.19×10 、2.13×10 和 8.09× 2018，61（17）：7929-7941.
10 L/mol）的 K a 值相似 ［32］ 。K a 值越大，配合物的紧 ［2］ BINDU S，MAZUMDER S，BANDYOPADHYAY U. Non-
4
steroidal anti-inflammatory drugs（NSAIDs）and organ damage：a
密程度和稳定性越强 ［18］ 。由此可见，KNGP-COX-2
current perspective［J/OL］.Biochemical pharmacology，2020，180：
的配合物有很强的结合力和稳定性，因此，KNGP 对 114147［2022-05-08］.https：//doi.org/10.1016/j.bcp.2020.114147.
COX-2 活性的抑制作用较强。不仅如此，随着温度 ［3］ 杨鹰，孙茹，曹艳花 .选择性环氧化酶-2抑制剂对心血管影响的
研究进展［J］.药学研究，2016，35（1）：41-45.YANG Y，SUN R，
升高，配合物 K a 值变大，这反映出 KNGP 和 COX-2
相互作用的稳定性升高 ［25］ 。进一步计算得到热力学 CAO Y H.Research progress on the effect of selective COX-2 in⁃
hibitors on cardiovascular diseases［J］.Journal of pharmaceutical
参数特征，其结果 ΔH>0（ΔH=6.85×10 kJ/mol）、
4
research，2016，35（1）：41-45（in Chinese with English abstract）.
2
ΔS>0（ΔS=2.42 ×10 J/（mol∙K））、ΔG<0（ΔG= ［4］ CHENG Y Y，CHEN T Y，YU P H，et al.Observations on the
-3.60×10 3 kJ/mol（298 K）、ΔG=-5.05×10 3 female reproductive cycles of captive Asian yellow pond turtles
kJ/mol（304 K）、ΔG=-6.50×10 kJ/mol（310 K））， （Mauremys mutica）with radiography and ultrasonography［J］.
3
Zoo biology，2010，29（1）：50-58.
表明结合过程中疏水作用是主要驱动作用，且是熵
［5］ LIU L L.Studies on bioactive peptide from Chinese soft-shelled
驱动的自发过程 ［22-23］ 。与我们的研究结果略有不 turtle（Pelodiscus sinensis）with functionalities of ACE inhibition
同，其他研究报道了疏水相互作用力和静电作用力 and antioxidation［J］.African journal of biotechnology，2012，11
是形成抗炎药-酶复合物的主要驱动力，且是自发和 （25）：6723-6729.
［6］ CHIU L H，HSU G S W，LU Y F.Antihypertensive capacity of
焓驱动的过程，如新型芳基异丙酸类化合物 ［22］ 、棉
defatted soft-shelled turtle powder after hydrolysis by gastrointes⁃
酚 ［15］ 等。这意味着相互作用的驱动力可能随抑制剂 tinal enzymes［J］. Journal of food biochemistry，2006，30（5）：
的结构变化而变化。同步荧光和三维荧光光谱分析 589-603.
表明在与 COX-2 的结合过程中，KNGP 结合位置可 ［7］ 蒋爽 .ACE 抑制肽的设计与抗酶解，抑制机理的研究［D］. 无
锡：江南大学，2014.JIANG S.Study on the design，enzyme-resis⁃
能更接近酪氨酸，而在保泰松和布洛芬与酶的结合
tant activity and inhibition mechanism of ACE inhibitory peptides
位置可能更接近色氨酸 ［18，33］ ，这表明结构不同的抑 ［D］. Wuxi：Jiangnan University，2014（in Chinese with English
制剂对活性位点氨基酸残基的影响会有差别。与侯 abstract）.
利杰等 ［18］ 在保泰松和孙艳涛等 ［33］ 在布洛芬与酶相 ［8］ GARDNER M L.Absorption of intact peptides：studies on trans⁃
port of protein digests and dipeptides across rat small intestine in
互作用的报道中一致，KNGP-COX-2 配合物的形成
vitro［J］. Quarterly journal of experimental physiology （Cam⁃
会影响酪氨酸和色氨酸残基的微环境，使二者周围 bridge，England），1982，67（4）：629-637.
的疏水性增强。ANS 荧光探针法结果表明 KNGP- ［9］ 郭文博，徐冰，刘一蔓，等 .中药：天然生物活性寡肽之库［J］.中
COX-2 配合物的形成导致 COX-2 的表面疏水性降 草药，2019，50（18）：4477-4484.GUO W B，XU B，LIU Y M，et
al.Chinese materia medica：a natural bioactive oligopeptides bank
低，说明 KNGP 可能引起 COX-2 的结构变化从而导
［J］. Chinese traditional and herbal drugs，2019，50（18）：4477-
致 活 性 降 低 。 表 面 疏 水 性 的 变 化 为 KNGP 引 起
4484（in Chinese with English abstract）.
COX-2 的结构变化从而导致活性降低的机制提供了 ［10］ LV Y B，ZHOU Q，FAN Y，et al.Intervention on immunodefi⁃