Page 243 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期
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第 5 期           张梦婷 等：表没食子儿茶素没食子酸酯和茶黄素对秀丽隐杆线虫耐温性的影响                                       237

               条件下秀丽隐杆线虫的平均寿命提高 13.1%                    ［15］ 。 病的发生和发展均与线粒体功能紊乱相关，因此，研
               Xiong 等 ［16］ 发现红茶提取物可延长热应激秀丽隐杆                   究外源性物质对其功能的影响尤为重要。研究表
               线虫的寿命。本研究通过测定不同浓度 EGCG 以及                        明，黄酮类化合物作为质子载体，通过线粒体解偶联
               TF1 对秀丽隐杆线虫在冷、热应激条件下存活率的                         消散线粒体膜电位诱导线粒体自噬，从而减轻与衰
               影响发现，25 μmol/L EGCG 显著提高了热应激秀丽                   老相关的神经退行性变          ［28］ 。FCCP 是一种线粒体解
               隐杆线虫的存活率，25 μmol/L TF1对热应激秀丽隐                    偶联剂，常作为线粒体膜电位试验中的阳性对照。
               杆线虫的存活率无显著影响。25 μmol/L EGCG 降                    它作用于线粒体内膜使大量质子回流，从而导致线

               低了秀丽隐杆线虫在冷应激条件下的存活率，而 25                         粒体膜电位降低、氧耗增加，跨膜产生的势能以热能
               μmol/L TF1 对冷应激秀丽隐杆线虫具有一定的保                      的形式散失而导致 ATP 生成减少             ［29］ 。为进一步探
               护作用。                                             究 TF1 是否可作为质子载体起到类似解偶联剂的作
                   为进一步验证 EGCG 及 TF1 对热、冷应激秀丽                   用，本研究还测定了不同温度条件下 EGCG 和 TF1
               隐杆线虫的保护作用差异，本研究测定了不同温度                           对秀丽隐杆线虫膜电位的影响。结果显示，在低温
               条件下 EGCG 和 TF1对秀丽隐杆线虫脂肪含量和线
                                                                条件下，TF1 短时间孵育 2 h 可显著降低秀丽隐杆线
               粒体膜电位水平的影响。有文献报道，冷应激可激
                                                                虫线粒体膜电位水平，而 EGCG 对秀丽隐杆线虫线
               活 PKA 信号进而上调激素敏感脂肪酶 hosl-1 的表
                                                                粒体膜电位水平无显著影响。这一结果说明 TF1 可
               达，脂肪酶诱导脂肪动员，导致甘油积累，从而保护
                                                                能起到类似解偶联剂FCCP的作用，通过降低线粒体
               秀丽隐杆线虫免受冷应激伤害              ［20］ 。本研究中，低温
                                                                膜电位，进而增加热能产生从而提高冷应激线虫的
              （4 ℃）条件下经 EGCG 和 TF1 短时间孵育后秀丽隐
                                                                存活率。本研究中线粒体膜电位试验使用的 TMRE
               杆线虫体内脂肪含量显著高于对照组，这一现象说
                                                                是一种可渗透细胞膜的橘红色阳离子荧光探针，可
               明 EGCG 和 TF1通过某种机制补偿了脂肪分解产生
                                                                在完整的线粒体中聚集，而去极化或非活跃性线粒
               甘油为秀丽隐杆线虫成虫早期提供的保护作用。
                                                                体膜电位降低，导致 TMRE积聚减少。有文献报道，
               Zhou 等 ［23］ 发现高温培养秀丽隐杆线虫提高了其体
                                                                由于线粒体中 TMRE 的积累依赖于线粒体活性，经
               内的总脂肪含量。而本研究结果显示高温（30 ℃）条
                                                                TMRE 染色之后，老年线虫体内荧光强度降低                   ［28］ 。
               件下 EGCG 和 TF1短时间孵育会降低秀丽隐杆线虫
                                                                本研究结果与其一致，长时间孵育后秀丽隐杆线虫
               体内的脂肪含量，但经 EGCG 孵育 5 d、TF1 孵育 7 d
                                                                体内荧光强度降低，但经 EGCG 和 TF1 孵育后衰老
               后秀丽隐杆线虫体内脂肪含量升高。作为绿茶和红
                                                                线虫体内的荧光强度提高，说明 EGCG 和 TF1 可提
               茶中的代表性组分，EGCG 和 TF1 的生物学活性已
                                                                高衰老线虫的活力。
               被广泛研究。例如，膳食中添加富含 EGCG 的绿茶
                                                                    综上，在 35 ℃热应激条件下，EGCG 对秀丽隐杆
               提取物（10 mg/mL EGCG）会影响果蝇的葡萄糖代
               谢，促进健康和延长寿命           ［24］ ；在健康小鼠模型中，模           线虫的保护作用强于 TF1；在 4 ℃冷应激条件下，
                                                                TF1对秀丽隐杆线虫的保护作用强于EGCG。在冷、
               拟人类喝茶的方式每天喂食25 mg/kg EGCG可以使
               其中位寿命延长 13.5%       ［25］ 。动物试验和人体试验结             热应激条件下，当孵育浓度为 25 μmol/L 时二者对比
               果均表明，TF1 可有效预防肥胖、减少甘油三酯的积                        最显著。与对照组相比，4 ℃条件下经 25 μmol/L
               累 ［26-27］ 。与先前报道的 EGCG 和 TF1具有降脂作用               TF1 短时间孵育后，秀丽隐杆线虫体内具有更高的
               一致，本研究以秀丽隐杆线虫为模型，通过测定正常                          脂 肪 含 量 和 更 低 的 线 粒 体 膜 电 位 ，而 25 μmol/L
               培养温度（20 ℃）条件下 EGCG和 TF1对其脂肪含量                    EGCG 对秀丽隐杆线虫线粒体膜电位无显著影响，
               的影响发现，经 EGCG 和 TF1 长时间（5、7 d）孵育后                 说明在冷应激条件下 TF1 可能是通过发挥类似线粒
               秀丽隐杆线虫体内脂肪含量显著降低。综上所述，                           体解偶联剂的作用而非脂肪动员，进一步促进线粒
               在 20 ℃条件下 EGCG 和 TF1 均表现出显著的降脂                   体生热从而减轻冷应激对秀丽隐杆线虫造成的伤
               作用，低温条件下可能通过某种机制对秀丽隐杆线                           害。正常温度条件下 EGCG 和 TF1均具有较好的降
               虫成虫早期发挥保护作用进而减少了脂肪动员，高                           脂作用。随着孵育时间的延长，衰老秀丽隐杆线虫
               温条件下可提高脂肪含量。                                     行为迟钝、生理功能下降，而 EGCG 和 TF1可减轻衰
                   线粒体功能与人体稳态息息相关，人类许多疾                         老对其造成的不利影响，改善其线粒体功能。
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