Page 180 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

174 华 中 农 业 大 学 学 报 第 41 卷

2.5 表面疏水性变化分析
KNGP对 COX-2表面疏水性的影响通过 COX-2
中 ANS 荧光强度变化来表示。如图 8 所示，KNGP
的加入导致 COX-2的表面疏水性降低。KNGP 可能
与 COX-2 的活性位点的亲水基团相互作用，导致酶
活性位点内的疏水性基团暴露，从而引起 COX-2 表
面的亲水基团暴露，使得 COX-2的构象发生变化，抑
制底物与COX-2的结合。

图 6 KNGP对COX-2的RSFQ曲线
Fig.6 The corresponding plot of RSFQ of
COX-2 with KNGP

图 8 KNGP对COX-2的ANS荧光光谱
Fig.8 ANS-fluorescence spectra of COX-2 with KNGP
2.6 分子对接结果
1）分子对接 ROC 曲线分析。基于 ROC 曲线（图
9）比较，可以看到-CDOCKER ENERGY（-ECD）曲
线下面积最大，证实负的受体-配体间的总能量-ECD
和负的受体-配体相互作用能量-CDOCKER INTER⁃
ACTION ENERGY（-IECD）能够较好地区分活性和
非活性分子，可以作为此次分子对接的打分函数，
且-ECD更能较好地体现分子的活性。其最终计算结
果，对应-ECD值越高，说明受体与配体间的总能量越
低，对接体系越稳定。
2）分 子 对 接 函 数 打 分 结 果 。 本 研 究 采 用
CDOCKER 分子对接模式进行模拟，通过模拟退火
得到了 KNGP、阳性对照（布洛芬和对乙酰氨基酚）
图 7 COX-2（A）三维荧光等高线图和在KNGP 的多个可能的构象，从中选择其中总能量最低的模
（0.47 mmol/L）时COX-2（B）三维荧光等高线图 拟结果进行分析和比较。如表 4所示，在模拟对接的
Fig.7 Three-dimensional fluorescencespectraofCOX-
KNGP、布洛芬和对乙酰氨基酚的-ECD 打分分别为
2 in absence（A）and presence of KNGP（0.47 mmol/L，B）
250.44、117.25和 61.53 kJ/mol，反映出的相互作用强
与酶相互作用后蛋白质周围微环境疏水性增强，极
度由大到小排列为 KNGP >布洛芬>对乙酰氨基
性减弱。同时，峰 2 的荧光强度也有所降低，荧光强
酚。可以看出，KNGP 对 COX-2 的抑制作用好于阳
度从 186.0 下降到 29.41，表明 KNGP-COX-2 复合物
性药物对照布洛芬和对乙酰氨基酚。表明 KNGP 可
的形成可能影响蛋白质的二级结构，并导致 COX-2
构象的松散。 能有很好的COX-2抑制活性。