Page 292 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

286 华 中 农 业 大 学 学 报 第 41 卷

1.7 4种毒素试纸的特异性验证 点，因其良好的操作性以及重复利用性，更适用于实
评定 4 种试纸条在 4 种毒素间的特异性。分别 验室环境的检测；立式阵列装置具有操作性欠佳、体
配制质量浓度为 5、120、400、6 400 ng/mL 的 AFB1 积小、轻便、密闭性好、重复利用性低等特点，因其轻
溶液、ZEN 溶液、OTA 溶液和 DON 溶液待用。用 便以及密闭性佳更适用于现场检测。其次从简单描
AFB1试纸缓冲液、ZEN 试纸缓冲液、OTA 试纸缓冲 述检验结果中选取易操作性、灵活性、重复利用性、
液、DON 试纸缓冲液对 4 种毒素溶液分别进行稀释 便携性以及现场适用性等 5种特征进行定量评价，与
混合 5 min（V 毒素溶液 ︰V 稀释液 =1︰5）。取混合液 200 普通胶体金试纸检测方法的特征进行比较，讨论制
μL，用试纸条进行特异性试验，25 min 后目测读取试 定统一标尺，特征强度指标为 1~9 分（由弱至强），由
7 名评价员独立进行评定，试验结果如图 3 所示。评
验结果，并利用智能手机采集结果图像，采用 Image J
软件对图像结果进行灰度分析。 定结果与简单描述检验相符，可知，卧式阵列装置具
1.8 实际样品的检测 有突出的可重复利用性能，立式阵列装置便携性强，
更适合于现场检测。由于检测方法的性能以及特异
1）选取玉米、玉米面、麦仁、花生、燕麦、薏仁、小
性验证在实验室环境中进行，同时考虑到重复利用性
麦、大米 8 种粮食样品，利用试纸及阵列装置进行 4
能以及灵活性，故选择卧式阵列装置进行后续试验。
种毒素的检测分析。粮食样品前处理：称取 5.0 g 粮
食样品均质，过孔径 0.85 nm 筛网，加入 12 mL 50%
乙醇-水溶液，充分振荡混合（150 r/min，3 min），离心
（4 000 r/min，5 min），除去沉淀，吸取上清液待用。
用AFB1试纸缓冲液、ZEN试纸缓冲液、OTA试纸缓
冲液、DON试纸缓冲液对上清液进行稀释混合 5 min
（V 上清液 ︰V 稀释液 =1︰5）。取混合液 200 μL，用试纸条
进行实际样品检测试验，25 min 后目测读取试验结
果，并利用智能手机采集结果图像，采用 Image J 软
件对图像结果进行灰度分析。
2）玉米、玉米面、麦仁样品的加标检测。AFB1
的加标质量浓度分别为 0、0.1、1 ng/mL；ZEN 的加标
质量浓度分别为 0、1、10 ng/mL；OTA 的加标质量浓
图3 试纸阵列装置描述性评定结果
度分别为 0、10、100 ng/mL；DON 的加标质量浓度分
Fig.3 Descriptive evaluation results
别为 0、10、100 ng/mL。分别用 AFB1 试纸缓冲液、
of dipstick array device
ZEN 试纸缓冲液、OTA 试纸缓冲液、DON 试纸缓冲 2.2 4种毒素免疫层析试纸的分析性能
液对加标粮食上清液进行稀释混合 5 min（V 上清液 /
为便于操作，将 4种毒素试纸采用统一的测试条
V 稀释液 =1︰5）。取混合液 200 μL，用试纸条进行实际 件，测定了一系列不同质量浓度毒素标准溶液，确定
样品加标检测实验，25 min 后目测读取试验结果，并 4 种 试 纸 的 最 高 检 出 限 值 、检 测 限 、线 性 范 围 。
利用智能手机采集结果图像，采用 Image J 软件对图 AFB1、ZEN、OTA、DON 试纸结果如图 4 所示，随着
像结果进行灰度分析。 毒素浓度不断增大，T 区显色逐渐变浅甚至消失，当
2 结果与分析 AFB1、ZEN、OTA、DON 质量浓度分别高达 3、100、
300、18 000 ng/mL 时，T 区颜色消失。因此，此时质
2.1 阵列装置的使用效果 量 浓 度 为 各 毒 素 试 纸 的 最 高 检 出 限 值 。 AFB1、
首先由 7 名独立评价员在相同试验环境以及规 ZEN、OTA、DON 试纸的检测限分别为 0.031、0.19、
定时间内，分别使用卧式、立式 2种阵列装置，对同一 0.78、0.22 ng/mL，线性范围分别为 0.1~3、1~100、
批次的试验样品（均为阴性样品），进行完整的检测 1~300、10~18 000 ng/mL。
操作，并对装置的使用效果进行描述性检验评价。 2.3 4种毒素免疫层析试纸特异性
由 2 种装置的特征可知，卧式阵列装置具有易操作、 分别以 5、120、400、6 400 ng/mL 的 AFB1 溶液、
灵活性强、重复利用性高、暴露性高、易受污染等特 ZEN 溶液、OTA 溶液和 DON 溶液进行特异性试验，