Page 282 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期

276 华 中 农 业 大 学 学 报 第 41 卷

磨过孔径 180 μm 的筛子后置于锥形瓶中，向其中加 （CH297-01）内统计发光时间内产生的光子数，经光
入 200 mL 乙腈-水（体积比 1∶9）混合溶液，在摇床上 信号-电信号转换后经显示屏读出化学发光强度 CL，
室温混匀 20 min。将混合液过滤并取 10 mL 滤液用 最终数据收集后采用 Origin 2019 软件作图，并对化
PBS 稀释至 50 mL。将预先保存在 4 °C 的免疫亲和 学发光免疫传感器的检测性能进行分析。
柱恢复到室温，取 25 mL 上述样液移至玻璃注射器 2 结果与分析
筒中，将空气泵与注射器另一端相连调节下滴速度，
控制液体以 1~2 滴/s 的速度流出，直至有空气进入 2.1 光纤探针的结构表征
柱内。弃置剩余液体后，向免疫亲和柱中加入 2 mL 由 红 外 光 谱 图（图 3A）可 知 ，未 修 饰 的 光 纤
甲醇洗脱，将洗脱液收集于离心管中用于测试分析。 在 3 440 cm -1 和 1 260 cm -1 处分别出现硅醇弯曲振
在小麦、大米和玉米样品提取液中加入不同质 动吸收峰和硅氧基反对称伸缩峰，这与光纤的二氧
量浓度（0.1、5、50、250 和 1 000 ng/mL）的 DON 标准 化硅纤芯材质相符。而对于 DON-BSA 修饰的光
溶液，按照本文“1.3 3）”所述的方法进行目标物检 纤，在 1 640 cm -1 和 1 540 cm -1 处出现的酰胺Ⅰ带的

测。同时，所有样品均按照食品安全国家标准 GB C=O伸缩振动峰和酰胺Ⅱ带的 N−H伸缩振动峰能
5009.111─2016《 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其 够与 BSA 的二级结构完全对应。此外，根据光纤表
乙酰化衍生物的测定》中 HPLC-MS 方法进行测定 面的能量色散光谱图（图 3B）分析结果，光纤修饰前
（n=3）。 主要由 C、O 和 Si 元素组成，而修饰 DON-BSA 的
1.11 数据采集及分析 EDS 分析图中可以明显看出 N、P 和 S 等蛋白质基础
本研究的数据采集主要使用光子计数探测器 元素的出现。为进一步证明光纤探针的成功制备，
（CH326），该探测器通过光纤介质传导收集免疫反 采用原子力显微镜（AFM）对光纤探针表面的 DON-
应 产 生 的 光 子 信 号 ，随 即 传 输 至 光 子 计 数 单 元 BSA 进行观察，可以明显看出经过修饰后的光纤表

图3 傅里叶变换红外光谱图（A）、能量色散光谱图（B）、修饰前的光纤探针（C）和
修饰完全抗原（BSA-DON）后的光纤探针（D）的原子力显微镜图
Fig.3 Fourier transform infrared spectrum（FT-IR）characterization diagram（A），energy dispersive
spectroscopy diagram（B），atomic force microscope characterization diagram of the optical fiber probe
without modification（C）and after BSA-DON modification（D）