Page 285 - 《华中农业大学学报(自然科学版)》2022年第5期
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第 5 期            黄伟 等:化学发光光纤免疫传感器的研制及其对谷物中呕吐毒素的快速检测                                       279




















                                  图7   化学发光光纤免疫传感器检测DON的标准曲线(A)和线性范围(B)
                 Fig.7  Standard curve(A)and linear range(B)of chemiluminescent fiber optic immunosensor for DON detection
                                   表1  化学发光光纤免疫传感器与参考文献中呕吐毒素检测方法的对比
                   Table 1  Comparison of chemiluminescent fiber optic immunosensors and DON detection methods in reference
                                                                        检出限/     分析时间/h     现场检测
                               方法                        样品                                           参考文献
                                                                       (ng/mL)    Analysis    Field
                              Method                     Sample                                       Reference
                                                                         LOD        time     operable
               倏逝波光流体免疫传感器                          玉米、小麦和猪饲料                                  是
                                                                         0.110     <2.0                 [19]
               Evanescent wave opto-fluidic immunosensor  Corn,wheat and pig feed             Yes
               纸基微流控装置                                 食品和饲料                                   是
                                                                         0.644     <2.0                 [20]
               Paper-based microfluidic device        Food and feed                           Yes
               超高效液相色谱与三重四极杆质谱联用
                                                      食用动物组织                                   否
               Ultraperformance liquid chromatography coupled with       0.070     <2.0                 [21]
                                                     Food animal tissues                      No
               triple-quadrupole mass spectrometry
               基于重组Fab片段的电化学免疫传感器
                                                      婴儿食品和麦片                                  否
               Recombinant fab-fragment based electrochemical im⁃       63.000     <2.5                 [22]
                                                    Baby food and cereal                      No
               munosensor
               化学发光光纤免疫传感器                           玉米、大米和小麦                                  是       本研究
                                                                        0.062 7    <1.5
               Chemiluminescent fiber optic immunosensors  Corn,rice and wheat                Yes     This study
               2.6  化学发光光纤免疫传感器与ELISA法的比对                       呕吐毒素的检测具有较好的稳定性和较强的抗干扰
                   ELISA 法是一种广泛应用于谷物中 DON 检测                    能力,几乎不受样品中复杂基质干扰。此外,我们将
               的商业化方法,因此,采用 ELISA 法与化学发光光纤                      测试的结果与国家标准方法液相色谱-质谱联用
               免疫传感器进行方法比对。如图 8A 所示,ELISA 检 (HPLC-MS)测试结果进行对比验证,如表 2所示,显
               测 DON 在目标物质量浓度 1~100 ng/mL 内呈线性                  示二者的检测结果具有较好的吻合性。但是化学发
               关系,线性方程为 y=0.4057x-1.17(其中 x 表示样                 光光纤免疫传感器的成本远低于 HPLC-MS,且检测
                                                  2
               品中目标物质量浓度,y 表示吸光度),R =0.976,检                    过程操作简单、检测设备集成便携,因此,其更适合
               出限为 2.13 ng/mL。由图 8B 可见,相较于 ELISA                应用于现场快速检测。
               法,化学发光光纤免疫传感器的灵敏度提高了 30倍,                        3   讨     论
               线性范围拓宽了 3个数量级,同时由于光纤免疫传感
               器尺寸小的特点,更适合现场快速检测的需要。                                本研究通过生物识别分子与光纤的固定化方
               2.7  谷物样品中呕吐毒素的检测及回收率测试                          法,采用共价结合策略实现了呕吐毒素完全抗原
                   3 种谷物样品(小麦、玉米、大米)的加标回收结 (DON-BSA)与光纤的稳定结合,研制了完全抗原功
               果和 RSD 测试结果见表 2。结果显示,不同加标浓                       能化的光纤探针。以化学发光免疫分析为基础,使
               度下同批次制备的化学发光光纤免疫传感器对谷物                           用固定完全抗原的光纤作为检测元件,以吖啶酯为
               样品中 DON 检测的回收率均在 81.00%~107.33%, 化学发光底物,建立了一种 DON 现场快速检测的化
               RSD 均低于 8.69%。表明该方法应用于谷物样品中                      学发光光纤免疫传感器,并通过一系列表征证明了
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