Page 105 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期
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第 5 期                      沈玥 等：喷施除草剂对橘园土壤及果实品质的影响                                         99

               特拉津除草剂浓度及次数的增加而降低。但也有研                           酸铵交换-火焰光度法测土壤速效钾含量                ［24］ 。
               究表明草甘膦处理对板栗根际土壤细菌群落多样性                           1.3  土壤微生物检测
               无显著影响     ［18］ 。                                     分别取每棵柑橘树滴水线附近 0~10 cm 表层土
                   综上，施用除草剂会对土壤理化性质和作物生                         壤或根际土壤，将同一棵树 4个不同方位的采样点的
               长发育带来较大负面影响，但在柑橘等果树作物上                           土样均匀混合为 1个样品。使用 OMEGA 土壤 DNA
               尚缺乏系统研究，尤其是关于除草剂对土壤微生物                           试剂盒（M5635-02）提取土壤总基因组 DNA（Omega
               的影响还不清晰甚至有一定争议。因此，本研究以                           Bio-Tek，Norcross，GA，USA），使 用 NanoDrop
               柑橘主栽品种温州蜜柑为材料，调查了田间条件下                           NC2000 分光光度计测量提取的土壤 DNA 的质量和
               草甘膦异丙胺盐、草铵膦及精喹禾灵等 3种常用除草                         浓 度（Thermo Fisher Scientific，Waltham，MA，
               剂的施用对土壤理化性质、土壤微生物及果实品质                           USA）。 利 用 正 向 引 物 338F（5′-ACTCCTAC⁃
               的影响，旨在为客观认识除草剂的作用、科学施用除                          GGGAGCAGCA-3′）和反向引物 806R（5′-GGAC⁃
               草剂提供依据。                                          TACHVGGGTWTCTAAT-3′）PCR 扩增细菌 16S

               1    材料与方法                                       rRNA 基因的 V3-V4 区域，送上海派森诺公司使用
                                                                Illlumina NovaSeq 测序。使用 QIIME2 和 R（3.2.0）
               1.1  材料与处理                                       进行序列数据分析。随后利用 QIIME2 中的 ASV 表
                   选择华中农业大学柑橘试验基地温州蜜柑（国                         计算 ASV 水平的 α 多样性指数（Shannon 多样性指
               庆 1 号 Citrus unshiu Marc.cv.Guoqing No.1）结果树     数）以调查群落物种丰富度和多样性等，并可视化为
               16株，树龄20 a，树体长势一致。该地块5 a内未施用                     箱线图；基于 Bray-Curtis 度量和 UniFrac 距离度量进
               供试除草剂。将此 16株供试植株随机分为对照组及                         行 β多样性分析，以调查样本中微生物群落的结构变
               T1、T2、T3 共 4 组，每组 4 棵树。对照组采用人工刈                  化，并通过主坐标分析（PCoA）进行可视化。
               割除草，处理组分别喷施 3 种不同的除草剂。T1 为                       1.4  果实产量和品质检测
               喷施 0.5% 草甘膦异丙胺盐（商品名：农达；农药登记                          果实达到可食用品质后（11 月 25 日）采样，每棵
               证号：PD73-88）、T2 为喷施 0.5% 草铵膦（商品名：焚                树在树冠外围随机采集 5个果实，施药和对照每个处
               草；农药登记证号：PD20171993）、T3为喷施 0.2% 精                理均为 4 棵树，每个处理各 20 个果实。利用电子天
               喹 禾 灵（商 品 名 ：精 禾 草 克 ；农 药 登 记 证 号 ： 平称取单果质量；利用*cm-5 色彩色差仪（美能达，日
                                                                                                    *
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               PD20095860）。遵循组间统一施药原则，自 2021 年 4                本）测定果皮的亮度值（L ）、红绿值（a）、黄蓝值
                                                                  *
               月 1 日首次施药后，每当杂草生长至出现第 3 片真叶 （b），并根据色差综合指标色差值的正负（CCI=
               或生长长度近 3 cm 时喷施除草剂             ［19］ ，直至果实成       1000×a /（L ×b））评价转色情况，CCI 为负值代表
                                                                           *
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               熟。本试验分别在4月1日、5月12日、5月29日、6月                      蓝绿色程度高，为正值则表示果皮偏向红色                  ［25］ ；每个
               16 日、7 月 3 日、8 月 1 日、8 月 22 日、9 月 29 日、10 月 4    处理的 20个果实随机分为 4份，每份 5个果实均取一
               日、11月13日共施药10次。                                  半果肉榨汁并混匀过滤，将滤液稀释 50 倍后滴于手
               1.2  土壤理化指标检测                                    持式数量测糖仪（0-53% PAL-1，日本 Atago 公司）
                   于喷施除草剂后 0 d、盛花期、坐果期、转色期 4                    监测点并直接读出果肉的可溶性固形物含量和可滴
               个时期随机选择每棵植株的 4个不同方位，取表层土                         定酸含量   ［26］ ；用草酸-二氯酚靛酚滴定法         ［27］ 测定维生
              （0~10 cm）土样并将来自同一植株的土样混合作为                        素C含量。
               1 个样品  ［20］ ，利用电位法测土壤 pH       ［21］ ，经典环刀法       1.5  数据分析
               测土壤容重     ［21］ 。                                     运用 Excel 2019 和 SPSS 进行数据统计及分析，

                   果实成熟后沿树体滴水线取表层土壤（0~10                        采用Duncun’s多重比较法进行差异显著性分析。
               cm）。利用苯酚钠法测土壤脲酶活性，3，5-二硝基水                       2   结果与分析
               杨酸法测土壤蔗糖酶活性，硝基酚比色法测土壤酸
               性和碱性磷酸酶活性         ［23］ ，重铬酸钾容量法-外加热法             2.1  喷施不同除草剂对橘园土壤理化性质的影响
               测土壤有机质含量，碱解-扩散法测土壤碱解氮含量，                             分别检测喷施除草剂 0 d、盛花期、坐果期、转色
               碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测土壤速效磷含量，乙                          期的橘园的土壤 pH 及容重（图 1）。结果表明：喷施
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