Page 84 - 《华中农业大学学报（自然科学版）》2022年第5期
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               1    材料与方法                                       然后根据 Kemper 等    ［13］ 方法计算团聚体平均质量直
                                                                径（mean weight diameter of aggregate，MWD）。依据
               1.1  共生真菌接种体
                                                                重铬酸钾容量法-外加热法           ［14］ 测定土壤有机碳（soil
                   供 试 AM 真 菌 为 细 凹 无 梗 囊 霉（Acaulospora         organic carbon，SOC）。采用土壤养分测定仪（HM-
               scrobiculata）、粘屑多样孢囊霉（Diversispora spurca）       TYD）分析土壤铵态氮、硝态氮、有效磷以及速效钾
               和地表多样孢囊霉（D. versiformis），由长江大学根系                 含量。
               生物学研究所提供，以白三叶为宿主进行盆栽繁殖 3
                                                                1.5  数据分析
               个月，收集根段和生长基质作为菌根真菌接种物，内
                                                                    运用 SAS 8.1 软件的 ANOVA 过程对处理间作
               含孢子、感染根段、孢子果和菌丝。印度梨形孢由长                          差异性测验，采用邓肯新复极差法进行多重比较
               江大学生命科学学院田志宏教授提供，采用Yang等                    ［7］  分析。
               方法获得孢子悬浮液，密度为1.72×10 CFU/mL。
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               1.2  试验设计                                        2   结果与分析
                   本试验采用单因素试验设计，包括接种 A. scro⁃                   2.1  共生真菌对伦晚脐橙根系真菌侵染率的影响
               biculata、D. spurca、D. versiformis、P. indica 和不接种     图 1 显示，接种共生真菌显著提高伦晚脐橙根
               外源真菌（对照）共 5 个处理，每个处理重复 4 次（2 棵                   系真菌侵染率，较对照提高了 17%~38%，其中接种
               树/重复），共40棵树。                                     A. scrobiculata 相对较低，其他 3 个共生真菌均显著
               1.3  共生真菌接种                                      促进侵染，且3个接种处理间差异不显著。
                   2019 年 5 月 10 日，在宜昌市兴山县峡口镇某柑
               橘园（31°12′N，110°79′E）等高梯田种植的 8 年生枳
               砧伦晚脐橙树（树体大小和生长势基本一致，果实已
               被采摘）进行真菌接种。接种前，土著 AM 真菌对根
               系的侵染率大致为 18.7%。对于 AM 真菌处理，在树
               干周围富集当年生须根的区域，挖取 2 个槽（长、宽、
               高均 20 cm），每槽施入 400 g AM 真菌菌剂，而印度                  1. 对照 Control；2. A. scrobiculata；3. D. spurca；4. D. versi⁃
               梨形孢的接种量为每棵树 9.25 g菌丝加 1.5 L 孢子悬                  formis 5. P. indica.
               浮液，均匀地施入 2 个槽中。对于未接种处理，同时                             图1  接种共生真菌对根系真菌侵染率的影响
               施入 800 g 灭菌 AM 菌剂和等量灭活的印度梨形孢                     Fig.1  The effect of inoculation with symbiotic fungi on
                                                                             root fungal colonization
               悬浮液。
                                                                2.2  共生真菌对伦晚脐橙果实外在品质的影响
               1.4  样品采集和测定方法
                                                                    所有共生真菌接种均显著提高了伦晚脐橙的
                   2020 年 4 月 17 日结束试验，采集处理树果实 10
                                                                坐果量，与未接种处理相比，接种 A. scrobiculata、
               个/棵以及少量根际土和根系，带回实验室。用游标
                                                                D. spurca、D. versiformis 和 P. indica 分 别 增 加 了
               卡尺直接测量果实纵、横径，电子天平称量单果质
                                                                117%、65%、152%、104%（表 1）。接种 A. scrobicu⁃
               量，CR10（日本）色差计测定果实色差，GY-B（中国）
               测定果实硬度，WYT-4（中国）手持测糖仪测定可溶                        lata、D. spurca、D. versiformis和 P. indica 的伦晚脐橙
                                      ［9］
               性固形物含量，采用滴定法 测定可滴定酸含量。果                          果实硬度均显著下降，分别下降了 39%、27%、22%、
               实蔗糖、果糖、葡萄糖含量参照分光光度法                    ［9］ 进行    26%。共生真菌对果实色差有一定的改善作用，但
               测定。                                              只有接种 D. spurca 和 D. versiformis 与对照间差异显
                   依照 Phillips 等 ［10］ 方法测定真菌侵染情况。参              著。接种共生真菌使果实横径显著增加，与对照相
               考 Wu 等 ［11］ 方法测定易提取球囊霉素相关土壤蛋白                    比，接种 A. scrobiculata、D. spurca、D. versiformis 和
              （easily extractable glomalin-related soil protein，EE-  P. indica 分别增加了 6%、11%、7%、8%。在接种处

               GRSP）和难提取球囊霉素相关土壤蛋白（difficultly                  理中，仅接种 D. versiformis 使果实纵径显著增加
               extractable glomalin-related soil protein，DE-GRSP） （7%），其余处理与对照差异不显著。共生真菌对
               含量。依照湿筛法         ［12］ 测定水稳性团聚体粒级分布， 伦晚脐橙果实色 差 有 一 定 的 改 善 作 用 ，其 中 接
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